液相色谱的流动相如何选择?需考虑哪些因素?
想要很好的对液相色谱流动相选择,就要知道什么事液相色谱的流动相,在液相色谱过程中前进的物质称为流动相。另一个阶段,样品在一定的状态下处于平衡状态。用作流动相的物质有:气体、液体、超临界流体等。常用的流动相主要有:乙腈-水溶液、乙腈-乙酸水溶液、甲醇-水溶液、乙腈-磷酸水溶液等。由于液相色谱中的流动相是液相,它与组分具有亲和力,参与固定相对组分的相互竞争。我们对液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此,流动相的正确选择直接影响到组分的分离程度。我们对对流动相溶剂的要求是:
(1)溶剂必须具有适当的极性和良好的选择性才能被测试。
(2)溶剂要与检测器匹配。对于紫外吸收检测器,应当注意的是,检测器波长长于溶剂的UV截止波长。溶剂的紫外截止波长意味着当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂被辐射强烈地吸收,此时溶剂被认为是光学不透明的,这严重干扰了组分的吸收测量。对于折光率检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达最高灵敏度。
(3)高纯度。由于液相的高灵敏度,同时也需要流动相溶剂的纯度,如果不纯的溶剂可能导致基线不稳定或假峰。由于痕量杂质的存在,截止波长将增加50%IOONM。
(4)化学稳定性好。不能与样品反应或聚合的溶剂。
(5)低粘度。如果使用高粘度溶剂,势必会增加压力,不利于等离子体质谱仪分离。常用的低粘度溶剂有丙酮、乙醇、乙腈等。但是,不能使用粘度太低的溶剂。例如戊烷、乙醚等,这样它们才能很容易在色谱柱或检测器中形成气泡,影响分离。
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